1. Hva er cellekultur?
Cellekultur refererer til å fjerne celler fra dyr eller planter og deretter dyrke dem i et gunstig kunstig miljø.Cellene kan tas direkte fra vevet og brytes ned ved hjelp av enzymatiske eller mekaniske midler før dyrking, eller de kan avledes fra etablerte cellelinjer eller cellelinjer.
2. Hva er primærkultur?
Primærkultur refererer til kulturstadiet etter at celler er separert fra vevet og formerer seg under passende forhold til de okkuperer alle tilgjengelige substrater (det vil si når sammenløp).På dette stadiet må cellene subkultureres ved å overføre dem til en ny beholder med friskt vekstmedium for å gi mer plass for fortsatt vekst.
2.1 Cellelinje
Etter den første subkulturen kalles primærkulturen en cellelinje eller subklon.Cellelinjer avledet fra primærkulturer har en begrenset levetid (dvs. de er begrenset; se nedenfor), og etter hvert som de passerer dominerer cellene med høyest vekstkapasitet, noe som resulterer i en viss grad av genotype i populasjonen som fortsetter med fenotype.
2.2 Cellestamme
Hvis en underpopulasjon av en cellelinje er positivt valgt fra kulturen ved kloning eller en annen metode, vil cellelinjen bli en cellestamme.Cellestammer får vanligvis ytterligere genetiske endringer etter at foreldrelinjen starter.
3.Begrensede og kontinuerlige cellelinjer
Normale celler deler seg vanligvis bare et begrenset antall ganger før de mister evnen til å formere seg.Dette er en genetisk betinget hendelse kalt senescence;disse cellelinjene kalles endelige cellelinjer.Noen cellelinjer blir imidlertid udødelige gjennom en prosess som kalles transformasjon, som kan skje spontant eller kan induseres av kjemikalier eller virus.Når en begrenset cellelinje gjennomgår transformasjon og får evnen til å dele seg i det uendelige, blir den en kontinuerlig cellelinje.
4. Kulturtilstand
Kulturforholdene for hver celletype er svært forskjellige, men det kunstige miljøet for dyrking av celler er alltid sammensatt av en passende beholder, som inneholder følgende:
4.1 Substrat eller kulturmedium som gir essensielle næringsstoffer (aminosyrer, karbohydrater, vitaminer, mineraler)
4.2 Vekstfaktorer
4.3 Hormoner
4.4 Gasser (O2, CO2)
4.5 Regulert fysisk og kjemisk miljø (pH, osmotisk trykk, temperatur)
De fleste celler er forankringsavhengige og må dyrkes på et fast eller halvfast substrat (adherent eller monolagskultur), mens andre celler kan vokse flytende i mediet (suspensjonskultur).
5. Kryokonservering
Hvis det er overflødige celler i subkulturen, bør de behandles med et passende beskyttelsesmiddel (som DMSO eller glyserol) og oppbevares ved en temperatur under -130 °C (kryokonservering) til de er nødvendige.For mer informasjon om subkultur og kryokonservering av celler.
6. Morfologi av celler i kultur
Celler i kultur kan deles inn i tre grunnleggende kategorier basert på deres form og utseende (dvs. morfologi).
6.1 Fibroblastceller er bipolare eller multipolare, har en langstrakt form og vokser festet til underlaget.
6.2 Epitellignende celler er polygonale, har en mer regelmessig størrelse og er festet til matrisen i diskrete ark.
6.3 Lymfoblastlignende celler er sfæriske og vokser vanligvis i suspensjon uten å feste seg til overflaten.
7. Anvendelse av cellekultur
Cellekultur er et av hovedverktøyene som brukes i celle- og molekylærbiologi.Det gir et utmerket modellsystem for å studere normal fysiologi og biokjemi til celler (som metabolsk forskning, aldring), effekten av medisiner og giftige forbindelser på celler, og mutagenese og kreftfremkallende effekter.Det brukes også til medikamentscreening og utvikling og storskala produksjon av biologiske forbindelser (som vaksiner, terapeutiske proteiner).Den største fordelen med å bruke cellekultur for noen av disse applikasjonene er konsistensen og reproduserbarheten til resultatene som kan oppnås ved bruk av en batch av klonede celler.
Innleggstid: Jun-03-2019