1.Velge riktig cellelinje
Når du velger riktig cellelinje for eksperimentet, bør du vurdere følgende kriterier:
a. Arter: Ikke-menneskelige og ikke-primat cellelinjer har vanligvis færre biosikkerhetsrestriksjoner, men til slutt vil eksperimentet ditt avgjøre om det skal brukes en kultur av en bestemt art.
b.Funksjoner: Hva er formålet med eksperimentet ditt?For eksempel kan cellelinjer avledet fra lever og nyre være mer egnet for toksisitetstesting.
c.Begrenset eller kontinuerlig: Selv om å velge fra en begrenset cellelinje kan gi deg flere muligheter for å uttrykke riktig funksjon, er kontinuerlige cellelinjer generelt lettere å klone og vedlikeholde.
d. Normal eller transformert: Transformerte cellelinjer har vanligvis en høyere veksthastighet og høyere seedingeffektivitet, er kontinuerlige og krever mindre serum i kulturmediet, men deres fenotype har gjennomgått permanente endringer gjennom genetisk transformasjon.
e.Vekstbetingelser og egenskaper: Hva er dine krav til veksthastighet, metningstetthet, kloningseffektivitet og suspensjonsvekstevne?For eksempel, for å uttrykke rekombinante proteiner i høye utbytter, må du kanskje velge cellelinjer som har høye veksthastigheter og evnen til å vokse i suspensjon.
f.Andre kriterier: Hvis du bruker en begrenset cellelinje, er det nok lager tilgjengelig?Er cellelinjen fullt karakterisert, eller må du verifisere den selv?Hvis du bruker en unormal cellelinje, finnes det en tilsvarende normal cellelinje som kan brukes som kontroll?Er cellelinjen stabil?Hvis ikke, hvor enkelt er det å klone det og generere nok frossen lager for eksperimentet ditt?
2. Få cellelinjer
Du kan bygge din egen kultur fra primærceller, eller du kan velge å kjøpe etablerte cellekulturer fra kommersielle eller ideelle leverandører (dvs. cellebanker).Anerkjente leverandører leverer høykvalitets cellelinjer som er nøye testet for integritet og sikrer at kulturen er fri for forurensninger.Vi anbefaler å ikke låne kulturer fra andre laboratorier fordi de har høy risiko for cellekulturkontaminering.Uavhengig av kilden, sørg for at alle nye cellelinjer er testet for mykoplasma-kontaminering før du begynner å bruke den.
Innleggstid: Feb-01-2023